Quantifying intracellular Mycobacterium tuberculosis : An essential issue for in vitro assays

Muchos estudios sobre microorganismos intracelulares que son importantes para las enfermedades que afectan a la salud pública se han centrado en el reconocimiento de las interacciones huésped-patógeno, determinando así los mecanismos por los que el patógeno invade una célula y la convierte en su huésped. Este conocimiento permite comprender la respuesta inmunológica desencadenada por estas interacciones para obtener información útil para el desarrollo de vacunas y medicamentos. Los protocolos de ensayo cuantitativo de infecciones celulares son indispensables en los estudios sobre Mycobacterium tuberculosis, que cada año se cobra la vida de más de 2 millones de personas en todo el mundo; sin embargo, a veces estos protocolos se ven limitados por el lento crecimiento del patógeno. Con respecto a dicha limitación, se presenta aquí una revisión detallada sobre los diferentes métodos para cuantificar y diferenciar un patógeno intracelular, la importancia de la disociación agregada de micobacterias y la multiplicidad de infecciones (MOI) en los ensayos de infección. Se discuten las diferencias, ventajas y desventajas de los métodos con respecto a la diferenciación de bacterias intracelulares y extracelulares (en la superficie de la célula), se describen los problemas actuales, así como las soluciones aportadas mediante el uso de fluoróforos y las proyecciones realizadas en relación con los ensayos cuantitativos de infección.