Application of Real-Time PCR Assays for the Diagnosis of Histoplasmosis in Human FFPE Tissues Using Three Molecular Targets

La histoplasmosis es una infección fúngica causada por el hongo térmicamente dimórfico Histoplasma capsulatum. Esta infección causa una importante morbilidad y mortalidad en las personas que viven con el VIH/SIDA, especialmente en países con recursos limitados. Las pruebas de diagnóstico utilizadas actualmente se basan en el cultivo y la serología, pero con algunas limitaciones. No existen ensayos moleculares disponibles en el mercado y los resultados de los distintos informes han sido variables. Nuestro objetivo era evaluar la PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) dirigida a tres genes codificadores de proteínas de Histoplasma capsulatum (antígenos 100-kDa, H y M) para la detección de este hongo en muestras fijadas en formol e incluidas en parafina (FFPE) de pacientes con histoplasmosis demostrada. La sensibilidad de los ensayos qPCR de 100-kDa, H y M fue del 93,9%, 91% y 57%, respectivamente. La especificidad de la qPCR de 100-kDa fue del 93% cuando se comparó con muestras de pacientes con otras micosis y otras infecciones, y del 100% cuando se utilizaron como controles muestras de pacientes con enfermedades no infecciosas. Nuestros hallazgos demuestran que los ensayos de PCR en tiempo real dirigidos al antígeno 100-kDa y H mostraron los resultados más fiables y pueden utilizarse con éxito para diagnosticar esta micosis cuando se analizan muestras FFPE.